Vilken är den bästa metoden?
—Tester för SARS-CoV-2-infektionsdiagnos
För bekräftade fall av covid-19, rapporterade de vanliga kliniska symtomen som feber, hosta, myalgi eller trötthet.Ändå är dessa symtom inte unika egenskaper hos covid-19 eftersom dessa symtom liknar de för andra virusinfekterade sjukdomar som influensa.För närvarande är virusnukleinsyra i realtid PCR (rt-PCR), CT-avbildning och vissa hematologiska parametrar de primära verktygen för klinisk diagnos av infektionen.Många laboratorietestsatser har utvecklats och använts för att testa patientprover för COVID-19 av kinesiska CDC1, US CDC2och andra privata företag.IgG/IgM antikroppstest, en serologisk testmetod, har också lagts till som ett diagnostiskt kriterium i Kinas uppdaterade version av diagnos- och behandlingsriktlinjerna för den nya coronavirussjukdomen (COVID-19), som utfärdades den 3 mars.1.Virusnukleinsyra rt-PCR-testet är fortfarande den nuvarande standarddiagnostikmetoden för diagnos av COVID-19.
StrongStep®Novel Coronavlrus (SARS-COV-2) Multiplex Real-Time PCR Kit (detektion för tre gener)
Ändå lider dessa PCR-testsatser i realtid, som letar efter genetiskt material från viruset, till exempel i nasala, orala eller anala pinnprover, av många begränsningar:
1) Dessa tester har långa omloppstider och är komplicerade i drift;det tar vanligtvis över 2 till 3 timmar att generera resultat.
2) PCR-testerna kräver certifierade laboratorier, dyr utrustning och utbildade tekniker för att fungera.
3) Det finns ett antal falskt negativa resultat för rt-PCR för COVID-19.Det kan bero på låg SARS-CoV-2-virusbelastning i pinnprovet i övre luftvägarna (Nytt coronavirus infekterar huvudsakligen de nedre luftvägarna, såsom lungalveoler) och testet kan inte identifiera personer som gick igenom en infektion, återhämtade sig och rensat viruset från deras kroppar.
Forskning av Lirong Zou et al4fann att högre virusmängder upptäcktes strax efter symtomdebut, med högre virusmängder upptäckt i näsan än i halsen och det virala nukleinsyramönstret för patienter infekterade med SARS-CoV-2 liknar det hos patienter med influensa4och verkar annorlunda än det som ses hos patienter infekterade med SARS-CoV-2.
Yang Pan et al5undersökte serieprover (halsprover, sputum, urin och avföring) från två patienter i Peking och fann att virusmängden i svalgprover och sputumprover nådde en topp vid cirka 5–6 dagar efter symtomdebut, sputumprover visade generellt högre virusmängder än svalgprover.Inget viralt RNA detekterades i urin- eller avföringsprover från dessa två patienter.
PCR-test ger bara ett positivt resultat när viruset fortfarande är närvarande.Testerna kan inte identifiera personer som gick igenom en infektion, tillfrisknat och rensat viruset från sina kroppar.I praktiken var endast cirka 30%-50% positiva för PCR hos patienter med kliniskt diagnostiserad ny coronavirus-lunginflammation.Många nya patienter med coronavirus-lunginflammation kan inte diagnostiseras på grund av negativt nukleinsyratest, så de kan inte få motsvarande behandling i tid.Från den första till den sjätte upplagan av riktlinjerna, enbart baserat på diagnosen av nukleinsyratestresultat, vilket orsakade stora problem för kliniker. Den tidigaste "whistle-blower", Dr Li Wenliang, ögonläkare vid Wuhan Central Sjukhuset, är död.Under sin livstid gjorde han tre nukleinsyratester vid feber och hosta, och förra gången fick han PCR-positiva resultat.
Efter diskussion av experter beslutades det att utöka serumtestmetoderna som ett nytt diagnostiskt kriterium.Medan antikroppstester, även kallade serologiska tester, kan bekräfta om någon var smittad även efter att deras immunförsvar har rensat bort viruset som orsakar covid-19.
StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM Antibody Rapid Test
IgG/IgM-antikroppstest kommer att hjälpa till att spåra på ett mycket mer befolkningsbaserat sätt vem som har haft infektionen, eftersom många fall verkar spridas från asymtomatiska patienter som inte lätt kan identifieras.Ett par i Singapore, maken testade positivt med PCR, hans frus PCR-testresultat var negativt, men antikroppstestresultaten visade att hon hade antikroppar, liksom hennes man.
Serologiska analyser måste noggrant valideras för att vara säker på att de reagerar tillförlitligt, men bara på antikroppar mot det nya viruset.En oro var att likheten mellan virus som orsakar allvarligt akut respiratoriskt syndrom och covid-19 kunde leda till korsreaktivitet.IgG-IgM utvecklad av Xue Feng wang6ansågs kunna användas som ett point-of-care-test (POCT), eftersom det kan utföras nära sängkanten med fingersticksblod.Satsen har en sensitivitet på 88,66 % och specificitet på 90,63 %.Men det fanns fortfarande falskt positiva och falskt negativa resultat.
I Kinas uppdaterade version av diagnos- och behandlingsriktlinjen för den nya coronavirussjukdomen (COVID-19)1, bekräftade fall definieras som misstänkta fall som uppfyller något av följande kriterier:
(1) Prover från luftvägarna, blod- eller avföringsprover testades positivt för SARS-CoV-2-nukleinsyra med rt-PCR;
(2)Genetisk sekvensering av virus från prover från luftvägar, blod eller avföring är mycket homolog med den kända SARS-CoV-2;
(3)Serumny coronavirusspecifik IgM-antikropp och IgG-antikropp var positiva;
(4)Serum ny coronavirus-specifik IgG-antikropp ändrad från negativ till positiv eller coronavirus-specifik IgG-antikropp under återhämtningsperioden är 4 gånger högre än den under den akuta perioden.
Diagnos och behandling av covid-19
| Riktlinjer | Publicerad | Bekräftade diagnostiska kriterier |
| Version 7 | 3 mars 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Version 6 | 18 februari 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Referens
1. Riktlinjer för diagnos och behandling av ny coronavirus-lunginflammation (testversion 7, National Health Commission of the People's Republic of China, utfärdad den 3 mars 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Forskning Använd endast RT-PCR-protokoll i realtid för identifiering av 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapore hävdar första användningen av antikroppstest för att spåra coronavirusinfektioner
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. SARS-CoV-2 viral belastning i prover från övre luftvägar från infekterade patienter 19 februari 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Viralbelastningar av SARS-CoV-2 i kliniska prover Lancet Infect Dis 2020 Publicerad online 24 februari 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Utveckling och klinisk tillämpning av ett snabbt IgM-IgG kombinerat antikroppstest för SARS-CoV-2
Infektionsdiagnos XueFeng Wang ORCID iD: 0000-0001-8854-275X
Posttid: 17 mars 2020
