En värld en kamp
─Internationellt samarbete för att bygga en global ödesgemenskap som svarar på utmaningen med covid-19-pandemin
Det nya coronaviruset som sveper över världen har resulterat i en pågående global covid-19-pandemikris.Det nya coronaviruset har inga gränser, inget land kommer att sparas från denna kamp mot COVID-19.Som svar på denna världsomspännande covid-19-pandemi ger Liming Bio-Products Corp bidrag för att stödja välbefinnandet för våra globala samhällen.
Vår värld står för närvarande inför den oöverträffade effekten av den nya pandemin coronavirus sjukdom 2019 (COVID-19).Hittills finns det inget effektivt läkemedel tillgängligt för behandling av denna sjukdom.Men många diagnostiska test har utvecklats för att upptäcka covid-19.Dessa tester är baserade på molekylära eller serologiska metoder för att detektera de nya coronavirusspecifika nukleinsyra- eller antikroppsbiomarkörerna.Eftersom COVID-19 har nått en pandemistatus är tidig diagnos av den nya coronavirusinfektionen avgörande för att bedöma spridningen av viruset och innehålla det, men ett perfekt test för universell användning finns ännu inte.Vi måste veta vilka tester som potentiellt kan användas för screening, diagnos och övervakning av covid-19-infektionen, och vilka är deras begränsningar.Det är mycket viktigt hur man bättre kan använda dessa vetenskapliga verktyg och hjälpa till att identifiera och kontrollera uppkomsten av denna snabbt spridande och allvarliga sjukdom.
Syftet med upptäckten av det nya coronaviruset är att avgöra om en individ som har COVID-19-infektion eller en asymptotisk bärare som kan sprida viruset tyst, för att tillhandahålla viktig information för att vägleda beslutsfattande för klinisk behandling.Tidigare studier har visat att 70 % av de kliniska besluten beror på testresultaten.När olika detektionsmetoder används är kraven för detektionsreagenssatserna också olika.
Figur 1
Figur 1:Diagram som visar nyckelstadierna av generella biomarkörnivåer under det typiska tidsförloppet för COVID-19-infektion.X-axeln anger antalet dagar av infektion, och Y-axeln anger virusmängden, koncentrationen av antigener och koncentrationen av antikroppar under olika perioder.Antikropp avser IgM- och IgG-antikroppar.Både RT-PCR och antigendetektering används för att detektera närvaron eller frånvaron av nytt coronavirus, vilket är direkt bevis för tidig upptäckt av patienter.Inom en vecka efter virusinfektion föredras PCR-detektion eller antigendetektion.Efter den nya coronavirusinfektionen i cirka 7 dagar har IgM-antikroppen mot det nya coronaviruset gradvis ökat i patientens blod, men varaktigheten av existensen är kort och dess koncentration minskar snabbt.Däremot uppträder IgG-antikroppen mot viruset senare, vanligtvis cirka 14 dagar efter virusinfektionen.IgG-koncentrationen ökar gradvis och den kvarstår under lång tid i blodet.Således, om IgM detekteras i patientens blod, betyder det att viruset nyligen har infekterats, vilket är en tidig infektionsmarkör.När IgG-antikroppen detekteras i patientens blod betyder det att virusinfektionen har funnits en tid.Det kallas också sen infektion eller tidigare infektion.Det ses ofta hos patienter som är i återhämtningsfasen.
Biomarkörerna för det nya coronaviruset
Det nya coronaviruset är ett RNA-virus, som består av proteiner och nukleinsyror.Viruset invaderar värdkroppen (människan), kommer in i cellerna genom bindningsstället motsvarande receptor ACE2 och replikerar i värdceller, vilket gör att det mänskliga immunsystemet svarar på främmande inkräktare och producerar specifika antikroppar.Därför kan nukleinsyrorna och antigenerna från flaskan och specifika antikroppar mot det nya coronaviruset teoretiskt användas som specifika biomarkörer för detektering av det nya coronaviruset.För nukleinsyradetektering är RT-PCR-teknologi den vanligaste, medan serologiska metoder vanligtvis används för att detektera de nya coronavirusspecifika antikropparna.För närvarande finns det en mängd olika testmetoder tillgängliga som vi kan välja för att testa COVID-19-infektion [1].
Grundläggande principer för huvudtestmetoder för nytt coronavirus
Många diagnostiska tester för COVID_19 är tillgängliga hittills, med fler testkit som har fått godkännande under ett nödtillstånd varje dag.Även om den nya testutvecklingen kommer ut med så många olika namn och format, förlitar sig alla nuvarande COVID_19-tester i grunden på två huvudteknologier: nukleinsyradetektion för det virala RNA:t och serologiska immunanalyser som detekterar virusspecifika antikroppar (IgM och IgG).
01. Nukleinsyradetektering
Omvänd transkription-polymeraskedjereaktion (RT-PCR), loop-medierad isotermisk amplifiering (LAMP) och nästa generations sekvensering (NGS) är de vanliga nukleinsyrametoderna för detektering av nytt coronavirus-RNA.RT-PCR är den första typen av test för COVID-19, rekommenderad av både Världshälsoorganisationen (WHO) och US Center for Disease Control and Prevention (CDC).
02. Detektion av serologisk antikropp
Antikropp är ett skyddande protein som produceras i människokroppen som svar på virusinfektionen.IgM är en tidig typ av antikropp medan IgG är en senare typ av antikropp.Serum- eller plasmaprovet undersöks vanligtvis för förekomst av specifika IgM- och IgG-typer av antikroppen för bedömning av akuta och konvalescenta faser av COVID-19-infektion.Dessa antikroppsbaserade detektionsmetoder inkluderar kolloidal guldimmunokromatografianalys, latex- eller fluorescerande mikrosfärimmunokromatografi, enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA) och kemiluminescensanalys.
03. Virusantigendetektion
Antigen är en struktur på viruset som känns igen av människokroppen och som utlöser immunförsvaret att producera antikroppar för att rensa viruset från blod och vävnader.Ett viralt antigen som finns på viruset kan målinriktas och detekteras genom att använda immunanalys.Liksom viralt RNA är virala antigener också närvarande i luftvägarna hos infekterade individer och kan användas för att diagnostisera akut fas av COVID-19-infektionen.Därför rekommenderas det ofta att ta prover från övre luftvägarna såsom saliv, nasofaryngeala och orofaryngeala pinnprover, djup hostsputum, bronkoalveolär sköljvätska (BALF) för initial antigentestning.
Val av testmetoder för nytt coronavirus
Att välja en testmetod involverar många faktorer, inklusive klinisk miljö, testkvalitetskontroll, handläggningstid, testkostnader, provtagningsmetoder, tekniska krav på laboratoriepersonal, krav på anläggningar och utrustning.Detekteringen av nukleinsyror eller virala antigener är att tillhandahålla direkta bevis på närvaron av virus och bekräfta diagnosen ny coronavirusinfektion.Även om det finns många metoder för antigendetektering, är deras detektionskänslighet för det nya coronaviruset teoretiskt lägre än för RT-PCR-amplifieringen.Antikroppstestning är detektion av antivirusantikroppar som produceras i människokroppen, som släpar efter i tiden och ofta inte kan användas för tidig upptäckt under den akuta fasen av virusinfektion.Den kliniska miljön för detektionstillämpningar kan variera, och provtagningsplatserna kan också vara olika.För detektering av virala nukleinsyror och antigener måste provet tas i luftvägarna där viruset finns, såsom nasofaryngeala pinnar, orofaryngeala pinnar, sputum eller bronchoalveolar lavage fluid (BALF).För antikroppsbaserad detektion måste blodprov tas och undersökas med avseende på närvaron av specifik antivirusantikropp (IgM/IgG).Antikropps- och nukleinsyratestresultat kan dock komplettera varandra.Till exempel, när testresultatet är nukleinsyranegativt, IgM-negativt men IgG-positivt, indikerar dessa resultat att patienten för närvarande inte bär på viruset, utan har återhämtat sig från den nya coronavirusinfektionen.[2]
Fördelar och nackdelar med nya coronavirustester
I Diagnosis and Treatment Protocol for Novel Coronavirus Pneumonia (Trial Version7) (släppt av National Health Commission & State Administration of Traditional Chinese Medicine den 3 mars 2020) används nukleinsyratestning som guldstandardmetoden för diagnosen av romanen coronavirusinfektion, samtidigt som antikroppstestning också anses vara en av bekräftelsemetoderna för diagnosen.
Patogena och serologiska fynd
(1) Patogena fynd: Ny coronavirus-nukleinsyra kan detekteras i nasofaryngeala pinnprover, sputum, sekret i de nedre luftvägarna, blod, avföring och andra prover med RT-PCR och/eller NGS-metoder.Det är mer exakt om prover tas från de nedre luftvägarna (sputum eller luftvägsextraktion).Proverna ska lämnas in för testning så snart som möjligt efter insamling.
(2) Serologiska fynd: NCP-virusspecifikt IgM blir detekterbart cirka 3-5 dagar efter debut;IgG når en titrering på minst 4-faldig ökning under konvalescensen jämfört med den akuta fasen.
Valet av testmetoder beror dock på geografiska platser, medicinska föreskrifter och kliniska miljöer.I USA utfärdade NIH behandlingsriktlinjer för Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) (webbplats uppdaterad: 21 april 2020) och FDA utfärdade policy för diagnostiska tester för Coronavirus Disease-2019 under folkhälsokrisen (utfärdad den 16 mars 2020 ), där serologisk testning av IgM/IgG-antikropparna endast väljs som ett screeningtest.
Nukleinsyradetektionsmetod
RT_PCR är ett mycket känsligt nukleinsyratest utformat för att upptäcka om det nya coronavirus-RNA:t finns i luftvägarna eller i andra prover.Ett positivt PCR-testresultat betyder närvaron av nytt coronavirus-RNA i provet för att bekräfta COVID-19-infektionen.Ett negativt PCR-testresultat betyder inte frånvaron av virusinfektionen eftersom den kan påverkas av dålig provkvalitet eller sjukdomstidpunkt vid återhämtningsfasen, etc.Även om RT-PCR är ett mycket känsligt test har det flera nackdelar.RT-PCR-tester kan vara arbetskrävande och tidskrävande, mycket beroende på den höga kvaliteten på provet.Detta kan vara en utmaning eftersom mängden viralt RNA inte bara varierar enormt mellan olika patienter utan också kan variera inom samma patient beroende på tidpunkterna när provet samlas in samt infektionsfaserna eller uppkomsten av kliniska symtom.För att upptäcka det nya coronaviruset krävs högkvalitativa prover som innehåller en tillräcklig mängd intakt viralt RNA.
RT-PCR-testet kan ge ett felaktigt negativt resultat (falskt negativt) för vissa patienter som har covid-19-infektion.Som vi vet är de viktigaste infektionsställena för det nya coronaviruset belägna i lungorna och de nedre luftvägarna, såsom alveoler och bronkier.Därför anses sputumprovet från en djup hosta eller bronkoalveolär sköljvätska (BALF) ha den högsta känsligheten för virusdetektion.I klinisk praxis samlas dock prover ofta in från de övre luftvägarna genom att använda nasofaryngeala eller orofaryngeala pinnar.Att samla in dessa prover är inte bara obekvämt för patienterna utan kräver också specialutbildad personal.För att göra provtagningen mindre invasiv eller enklare kan patienterna i vissa fall få en munspinn och låta dem ta ett prov från munslemhinnan eller tungan genom att svabba sig.Utan tillräckligt med viralt RNA kan RT-qPCR returnera ett falskt negativt testresultat.I Hubei-provinsen, Kina, rapporterades RT-PCR-känslighet vid den initiala upptäckten endast till cirka 30 %–50 %, med ett genomsnitt på 40 %.Den höga andelen falsknegativa orsakades sannolikt av otillräcklig provtagning.
Dessutom kräver RT-PCR-testet högutbildad personal för att utföra komplexa RNA-extraktionssteg och PCR-amplifieringsprocedur.Det kräver också en högre nivå av biosäkerhetsskydd, speciell laboratorieanläggning och realtids-PCR-instrument.I Kina måste RT-PCR-testet för covid-19-detektering utföras i biosäkerhetsnivå 2-laboratorier (BSL-2), med personalskydd som använder biosäkerhetsnivå 3 (BSL-3) praxis.Enligt dessa krav, från början av januari till början av februari 2020, kunde kapaciteten hos China Wuhans CDC-laboratorium endast upptäcka några hundra fall per dag.Normalt sett skulle detta inte vara ett problem när man testar andra infektionssjukdomar.Men när man hanterar en global pandemi som COVID-19 med potentiellt miljontals människor som ska testas, blir RT-PCR en kritisk fråga på grund av dess krav på speciella laboratorieanläggningar eller teknisk utrustning.Dessa nackdelar kan begränsa RT-PCR för att användas som ett effektivt verktyg för screening, och kan också leda till förseningar i rapporterna om testresultat.
Serologisk antikroppsdetektionsmetod
Med utvecklingen av sjukdomsförloppet, särskilt i mitten och sena stadier, är antikroppsdetekteringshastigheten mycket hög.En studie vid Wuhan Central South Hospital visade att antikroppsdetekteringsfrekvensen kunde nå mer än 90 % under den tredje veckan av covid-19-infektion.Antikroppen är också produkten av det mänskliga immunsvaret mot det nya coronaviruset.Antikroppstestet erbjuder flera fördelar jämfört med RT-PCR.För det första testar den serologiska antikroppen enkelt och snabbt.Antikropps laterala flödestester kan användas för vårdpunkten för att leverera ett resultat på 15 minuter.För det andra är målet som detekteras av det serologiska testet antikroppen, som är känd för att vara mycket mer stabil än viralt RNA.Under insamling, transport, förvaring och testning är proverna för antikroppstester i allmänhet mer stabila än proverna för RT-PCR.För det tredje, eftersom antikroppen är jämnt fördelad i blodcirkulationen, finns det mindre provtagningsvariationer jämfört med nukleinsyratestet.Den provvolym som krävs för antikroppstestet är relativt liten.Till exempel räcker 10 mikroliter fingersticksblod för användning i antikroppslateralflödestestet.
I allmänhet är antikroppstestet valt som ett komplementverktyg för nukleinsyradetektering för att förbättra upptäcktshastigheten för det nya coronaviruset under sjukdomsförloppen.När antikroppstestet används tillsammans med ett nukleinsyratest kan det öka analysnoggrannheten för diagnosen covid19 genom att minska potentiella falskt positiva och falskt negativa resultat.Den nuvarande driftsguiden rekommenderar inte att två typer av test används separat som ett oberoende detekteringsformat utan bör användas som ett kombinerat format.[2]
Figur 2:Den korrekta tolkningen av nukleinsyra- och antikroppstestresultat för upptäckt av ny coronavirusinfektion
Bild 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. – Nytt coronavirus IgM/IgG antikropp dubbelt snabbtestkit (StrongStep®SARS-CoV-2 IgM/IgG antikroppssnabbtest, lateximmunokromatografi)
Figur 4:Liming Bio-Products Co., Ltd. – StrongStep®Novel Coronavirus (SARS-CoV-2) Multiplex Real-Time PCR-kit (detektion för tre gener, fluorescerande sondmetod).
Notera:Detta mycket känsliga, bruksfärdiga PCR-kit finns tillgängligt i lyofiliserat format (frystorkningsprocess) för långtidsförvaring.Satsen kan transporteras och förvaras i rumstemperatur och är hållbar i ett år.Varje rör med förblandning innehåller alla reagenser som behövs för PCR-amplifieringen, inklusive omvänt transkriptas, Taq-polymeras, primers, prober och dNTPs-substrat. Användare kan helt enkelt rekonstituera blandningen genom att tillsätta vatten av PCR-kvalitet tillsammans med mallen och sedan ladda på ett PCR-instrument för att köra amplifieringen.
Som svar på det nya coronavirusutbrottet har Liming Bio-Products Co., Ltd. arbetat snabbt för att utveckla två diagnostiska kit för att göra det möjligt för kliniska och folkhälsolaboratorier att snabbt diagnostisera COVID-19-infektion.Dessa kit är mycket lämpliga för användning för storskalig screening i länder och regioner där det nya coronavirusutbrottet snabbt sprider sig, och för att ge diagnos och bekräftelse för COVID-19-infektion.Dessa kit är endast för användning under föranmäld nödtillstånd (PEUA).Testning är begränsad till laboratorier som är certifierade enligt nationella eller lokala myndigheters föreskrifter.
Antigendetekteringsmetod
1. Viral antigendetektering klassificeras i samma kategori av direkt detektion som nukleinsyradetektion.Dessa direkta detektionsmetoder letar efter bevis på virala patogener i provet och kan användas för bekräftelse av diagnos.Utvecklingen av antigendetektionskit kräver dock hög kvalitet på monoklonala antikroppar med stark affinitet och hög känslighet som kan känna igen och fånga patogena virus.Det tar vanligtvis mer än sex månader att välja och optimera en monoklonal antikropp som lämpar sig för användning vid beredningen av antigendetektionssatsen.
2. För närvarande är reagenserna för direkt upptäckt av det nya coronaviruset fortfarande under forsknings- och utvecklingsstadium.Därför har inget antigendetektionskit blivit kliniskt validerat och kommersiellt tillgängligt.Även om det tidigare rapporterats att ett diagnostikföretag i Shenzhen har utvecklat ett antigendetektionskit och kliniskt testat i Spanien, kunde analysens tillförlitlighet och noggrannhet inte valideras på grund av förekomsten av reagenskvalitetsproblem.Hittills har NMPA (tidigare Kina FDA) inte godkänt något antigendetektionskit för klinisk användning ännu.Sammanfattningsvis har en mängd olika detektionsmetoder utvecklats.Varje metod har sina fördelar och begränsningar.Resultaten från olika metoder kan användas för verifiering och komplement.
3. Att producera ett kvalitetstestpaket för COVID-19 är starkt beroende av optimering under forskning och utveckling.Liming Bio-Product Co.,Ltd.testkit krävs för att uppfylla stränga tillverknings- och kvalitetskontrollstandarder för att säkerställa att de ger högsta prestanda och konsistens.Forskarna vid Liming Bio-Product Co., Ltd. har över tjugo års erfarenhet av att designa, testa och optimera in vitro-diagnostiksatser för att säkerställa högsta prestanda vid analytisk kvantifiering.
Under covid-19-pandemin mötte den kinesiska regeringen en ökning av den enorma efterfrågan på epidemiförebyggande material i de internationella hotspots.Den 5 april, vid presskonferensen för statsrådets gemensamma förebyggande och kontrollmekanism "Att stärka kvalitetshanteringen av medicinskt material och reglera marknadens ordning", Jiang Fan, en inspektör på första nivån vid ministeriets utrikeshandelsavdelning of Commerce, sade: "Närnäst kommer vi att fokusera våra ansträngningar på två aspekter, för det första att påskynda stödet till fler medicinska förnödenheter som behövs av det internationella samfundet, och även att förbättra kvalitetskontroll, reglering och hantering av produkterna. Vi kommer att ge Kinas bidrag till att gemensamt reagera på den globala epidemin och bygga en gemenskap med en gemensam framtid för mänskligheten.
Figur 5:Liming Bio-Products Co., Ltd.s nya coronavirusreagens har erhållit EU:s CE-registreringscertifikat
Hedersbeviset
Houshenshan
Figur 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. stödde Wuhan Vulcan(HouShenShan) Mountain Hospital för att bekämpa covid-19-epidemin och tilldelades Wuhan Röda Korsets hederscertifikat.Wuhan Vulcan Mountain Hospital är det mest kända sjukhuset i Kina som är specialiserat på behandling av allvarliga COVID-19-patienter.
När det nya coronavirusutbrottet fortsätter att spridas över världen, går Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. upp för att stödja och hjälpa samhällen över hela världen med vår innovativa teknik för att bekämpa detta globala hot utan motstycke.Snabba tester av covid-19-infektion är en kritisk del för att hantera detta hot.Vi fortsätter att bidra på ett betydande sätt genom att tillhandahålla diagnostiska plattformar av hög kvalitet i händerna på sjukvårdspersonal i frontlinjen så att människor kan få de kritiska testresultat de behöver.Liming Bio-products Co., Ltd:s ansträngningar i kampen mot COVID-19-pandemin är att bidra med vår teknologi, erfarenheter och expertis till internationella samhällen för att bygga en global ödesgemenskap.
Långt tryck~Skanna och följ oss
E-post: sales@limingbio.com
Webbplats: https://limingbio.com
Posttid: maj-01-2020
