En värld en kamp
─ Internationellt samarbete för att bygga ett globalt samhälle av gemensamt öde som svarar på covid-19 pandemisk utmaning
Det nya Coronavirus som sveper över hela världen har resulterat i en pågående global covid-19-pandemisk kris. Det nya Coronaviruset har inga gränser, inget land kommer att skonas från denna strid mot covid-19. Som svar på denna världsomspännande covid-19-pandemi ger Liming Bio-Products Corp bidrag för att stödja våra globala samhällen.
Vår värld står för närvarande inför den enastående effekten av den nya Coronavirus-sjukdomen 2019 (Covid-19) Pandemic. Hittills finns det inget effektivt läkemedel tillgängligt för behandling av denna sjukdom. Många diagnostiska tester har emellertid utvecklats för detektion av covid-19. Dessa tester är baserade på molekylära eller serologiska metoder för att upptäcka den nya koronavirusspecifika nukleinsyra eller antikroppsbiomarkörer. Eftersom covid-19 har nått en pandemisk status är tidig diagnos av den nya koronavirusinfektionen avgörande för att bedöma spridningen av viruset och innehåller det, men ett perfekt test för universell användning finns ännu inte. Vi måste veta vilka tester som potentiellt kan användas för screening, diagnos och övervakning av infektionen Covid-19 och vilka är deras begränsningar. Det är mycket viktigt hur man kan utnyttja dessa vetenskapliga verktyg bättre och för att identifiera och kontrollera uppkomsten av denna snabbt spridande och allvarliga sjukdom.
Syftet med detekteringen av det nya koronaviruset är att avgöra om en person som har infektion i covid-19 eller en asymptotisk bärare som kan sprida viruset tyst för att ge viktig information för att vägleda beslutsfattande för klinisk behandling. Tidigare studier har visat att 70% av kliniska beslut beror på testresultaten. När olika detekteringsmetoder används är kraven för detekteringsreagenssatserna också olika.
Figur 1
Figur 1:Diagram som visar de viktigaste stadierna för allmänna biomarkörnivåer under den typiska tidsförloppet för covid-19-infektion. X-axeln indikerar antalet infektionsdagar, och y-axeln indikerar den virala belastningen, koncentrationen av antigen och koncentration av antikroppar under olika perioder. Antikropp hänvisar till IgM och IgG -antikroppar. Både RT-PCR- och antigendetektering används för att upptäcka närvaron eller frånvaron av nya koronavirus, vilket är direkt bevis för tidig patientdetektering. Inom en vecka efter virusinfektion föredras PCR -detektion eller antigendetektering. Efter den nya koronavirusinfektionen i cirka 7 dagar har IgM -antikroppen mot det nya koronaviruset gradvis ökat i patientens blod, men varaktigheten på existensen är kort och dess koncentration minskar snabbt. Däremot visas IgG -antikroppen mot viruset senare, vanligtvis cirka 14 dagar efter virusinfektionen. IgG -koncentrationen ökar gradvis och den kvarstår en lång period i blodet. Således, om IgM upptäcks i patientens blod, betyder det att viruset nyligen har infekterat, vilket är en tidig infektionsmarkör. När IgG -antikroppen detekteras i patientens blod, betyder det att den virala infektionen har varit under en tid. Det kallas också sen infektion eller tidigare infektion. Det ses ofta hos patienter som är i återhämtningsfasen.
Biomarkörerna för nya koronavirus
Det nya koronaviruset är ett RNA -virus, som består av proteiner och nukleinsyror. Viruset invaderar värden (mänsklig) kropp, kommer in i celler genom bindningsställe motsvarande receptor ACE2 och replikeras i värdceller, vilket får det mänskliga immunsystemet att svara på främmande inkräktare och producera specifika antikroppar. Därför kan flaskans nukleinsyror och antigener och specifika antikroppar mot nya koronavirus teoretiskt användas som specifika biomarkörer för detektion av det nya koronaviruset. För detektering av nukleinsyror är RT-PCR-teknik den mest använda, medan serologiska metoder vanligtvis används för detektion av de nya koronaviruspecifika antikropparna. För närvarande finns det en mängd olika testmetoder som vi kan välja för att testa covid-19-infektion [1].
Grundläggande principer för huvudtestmetoder för nya koronavirus
Många diagnostiska tester för COVID_19 finns hittills tillgängliga, med fler testkit som får godkännande under ett godkännande av nödanvändning varje dag. Även om den nya testutvecklingen som kommer ut med så många olika namn och format, förlitar alla de nuvarande covid_19-testen i princip på två huvudteknologier: nukleinsyradetektering för det virala RNA och serologiska immunanalyser som detekterar virala specifika antikroppar (IgM och EgG).
01. Nukleinsyradetektion
Omvänd transkription-polymeras-kedjereaktion (RT-PCR), slingmedierad isotermamplifiering (LAMP) och nästa generations sekvensering (NGS) är de vanliga nukleinsyrametoderna för detektion av nya koronavirus RNA. RT-PCR är den första typen av test för covid-19, rekommenderad av både Världshälsoorganisationen (WHO) och US Center for Disease Control and Prevention (CDC).
02.Serologisk antikroppsdetektering
Antikropp är ett skyddande protein som produceras i människokroppen som svar på virusinfektionen. IgM är en tidig typ av antikropp medan IgG är en senare typantikropp. Serum- eller plasmaprovet undersöks vanligtvis för närvaro av specifika IgM- och IgG-typer av antikroppen för bedömning av akuta och konvalescent faser av covid-19-infektion. Dessa antikroppsbaserade detekteringsmetoder inkluderar kolloidalt guldimmunokromatografi-analys, latex eller fluorescerande mikrosfärimmunokromatografi, enzymbunden immunosorbentanalys (ELISA) och kemiluminescensanalys.
03.viral antigendetektering
Antigen är en struktur på viruset som erkänns av människokroppen som utlöser immunförsvarssystemet för att producera antikroppar för att rensa viruset från blod och vävnader. Ett viralt antigen som finns på viruset kan riktas och detekteras med användning av immunanalys. Liksom viralt RNA finns virala antigener också i luftvägarna hos infekterade individer och kan användas för att diagnostisera akutfas för covid-19-infektionen. Därför rekommenderas det ofta att samla upp övre luftvägar såsom saliv, nasofaryngeal och orofaryngeal vattpinnar, djup hostsputum, bronkoalveolär sköljvätska (BALF) för initial antigenprovning.
Att välja testmetoder för nya koronavirus
Att välja en testmetod involverar många faktorer, inklusive klinisk inställning, testning av kvalitetskontroll, väntetid, testkostnader, provtagningsinsamlingsmetoder, tekniska krav på laboratoriepersonal, anläggning och utrustningskrav. Upptäckten av nukleinsyror eller virala antigener är att tillhandahålla direkta bevis på närvaron av virus och bekräfta diagnosen ny koronavirusinfektion. Även om det finns många metoder för antigendetektering, är deras detekteringskänslighet för det nya koronavirus teoretiskt lägre än för RT-PCR-amplifieringen. Antikroppstestning är detekteringen av antivirusantikroppar som produceras i människokroppen, som släpar i tid och ofta inte kan användas för tidig detektion under den akuta fasen av virusinfektion. Den kliniska inställningen för detekteringsapplikationer kan variera, och provinsamlingsplatserna kan också vara olika. För detektering av virala nukleinsyror och antigener måste provet samlas in i luftvägarna där viruset är närvarande, såsom nasopharyngeal swabs, orofaryngeal suddar, sputum eller bronkoalveolär sköljvätska (BALF). För antikroppsbaserad detektion måste blodprov samlas in och undersökas för närvaro av specifik antiviru-antikropp (IgM/IgG). Emellertid kan antikropps- och nukleinsyratestresultat komplettera varandra. Till exempel, när testresultatet är det nukleinsyra-negativa, IgM-negativa men IgG-positiva, indikerar dessa resultat att patienten för närvarande inte bär viruset utan har återvunnits från den nya koronavirusinfektionen. [2]
Fördelar och nackdelar med nya Coronavirus -test
I diagnos- och behandlingsprotokollet för nya koronavirus lunginflammation (Testversion7) (släppt av National Health Commission & State Administration of Traditional Chinese Medicine den 3 mars 2020) används nukleinsyratestning som guldstandardmetod för diagnosen av romanen Coronavirus -infektion, medan antikroppstestning också betraktas som en av bekräftelsemetoderna för diagnosen.
Patogena och serologiska fynd
(1) Patogena fynd: Nya koronavirus nukleinsyra kan detekteras i nasofaryngeala vattpinnar, sputum, nedre luftvägsutsöndringar, blod, avföring och andra prover med RT-PCRAND/eller NGS-metoder. Det är mer exakt om prover erhålls från lägre luftvägar (sputum- eller luftkanalekstraktion). Proverna bör skickas för testning så snart som möjligt efter insamling.
(2) Serologiska fynd: NCP-virusspecifikt IgM blir detekterbara cirka 3-5 dagar efter början; IgG når en titrering av minst 4-faldig ökning under konvalescens jämfört med den akuta fasen.
Valet av testmetoder beror emellertid på geografiska platser, medicinska bestämmelser och kliniska inställningar. I USA utfärdade NIH Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) behandlingsriktlinjer (platsuppdaterad: 21 april 2020) och FDA utfärdade policy för diagnostiska tester för Coronavirus sjukdom-2019 under folkhälsokriminaliteten (utfärdad 16 mars20202020 ), där serologisk testning av IgM/IgG -antikropparna endast valda som ett screeningtest.
Nukleinsyradetekteringsmetod
RT_PCR är ett mycket känsligt nukleinsyratest utformat för att upptäcka om det nya koronavirus -RNA finns i andningsorganen eller annat prov. Ett positivt PCR-testresultat innebär närvaron av nya koronavirus-RNA i provet för att bekräfta infektionen Covid-19. Ett negativt PCR -testresultat betyder inte frånvaron av virusinfektion eftersom det kan påverkas av dålig provkvalitet eller sjukdomstidspunkt vid den återvunna fasen osv. Även om RT-PCR är ett mycket känsligt test har det flera nackdelar. RT-PCR-test kan vara arbetsintensiva och tidskrävande, avgörande beroende av provets höga kvalitet. Detta kan vara en utmaning eftersom mängden viralt RNA inte bara varierar enormt mellan olika patienter utan också kan variera inom samma patient beroende på tidpunkter när provet samlas in såväl som infektionsfaserna eller början av kliniska symtom. Att upptäcka det nya koronaviruset kräver högkvalitativa prover som innehåller en tillräcklig mängd intakt viralt RNA.
RT-PCR-testet kan ge ett felaktigt negativt resultat (falskt negativt) för vissa patienter som har infektion med covid-19. Som vi vet är de huvudsakliga infektionsplatserna för det nya koronaviruset beläget vid lungan och de nedre luftvägarna, såsom alveoler och bronchi. Därför anses sputumprovet från en djup hosta eller den bronkoalveolära sköljvätskan (BALF) ha den högsta känsligheten för viral detektion. I klinisk praxis samlas emellertid prover ofta från de övre luftvägarna genom att använda nasofaryngeal eller orofaryngeal vattpinnar. Att samla in dessa prover är inte bara obekväm för patienter utan kräver också specialutbildad personal. För att göra provtagning mindre invasiv eller enklare kan i vissa fall patienterna få en oral vattpinne och låta dem ta ett prov från buccal slemhinnan eller tungan som sviker sig själva. Utan tillräckligt viralt RNA kan RT-QPCR returnera ett falskt negativt testresultat. I Hubei-provinsen rapporterades Kina, RT-PCR-känslighet i den första upptäckten endast cirka 30%-50%, med i genomsnitt 40%. Den höga frekvensen av falskt negativt orsakades troligen av otillräcklig provtagning.
Dessutom kräver RT-PCR-testet högt utbildad personal för att utföra komplexa RNA-extraktionssteg och PCR-amplifieringsförfarande. Det kräver också en högre nivå av biosäkerhetsskydd, speciell laboratorieanläggning och PCR-instrument i realtid. I Kina måste RT-PCR-testet för covid-19-detektion utföras i biosäkerhetsnivå 2-laboratorier (BSL-2), med personalskydd med användning av biosäkerhetsnivå 3 (BSL-3). Enligt dessa krav, från början av januari till början av februari 2020, kunde kapaciteten för Kinas Wuhans CDC -laboratorium bara upptäcka några hundra fall per dag. Normalt skulle detta inte vara ett problem när man testar andra infektionssjukdomar. Men när man hanterar en global pandemi som Covid-19 med potentiellt miljoner människor som ska testas blir RT-PCR en kritisk fråga på grund av dess krav för speciallaboratorieanläggningar eller teknisk utrustning. Dessa nackdelar kan begränsa RT-PCR som ska användas som ett effektivt verktyg för screening och kan också leda till förseningar i rapporterna om testresultat.
Serologisk antikroppsdetekteringsmetod
Med utvecklingen av sjukdomsbanan, särskilt i mitten och sena stadier, är antikroppsdetekteringsgraden mycket hög. En studie på Wuhan Central South Hospital visade att antikroppsdetekteringsgraden kunde nå mer än 90% under den tredje veckan med Covid-19-infektion. Antikroppen är också produkten av det mänskliga immunsvaret mot det nya koronaviruset. Antikroppstestet erbjuder flera fördelar jämfört med RT-PCR. För det första testar den serologiska antikroppen enkel och snabb. Antikroppslaterala flödesprov kan användas för vårdpunkt för att leverera ett resultat på 15 minuter. För det andra är målet som detekteras med det serologiska testet antikroppen, som är känd för att vara mycket mer stabilt än viralt RNA. Under insamling, transport, lagring och testning är proverna för antikroppstester i allmänhet mer stabila än proverna för RT-PCR. För det tredje, eftersom antikroppen är jämnt fördelad i blodcirkulationen, finns det mindre provtagningsvariation jämfört med nukleinsyratestet. Provvolymen som krävs för antikroppstestet är relativt litet. Till exempel är 10 mikroliter fingerprickblod tillräcklig för användning i antikroppens laterala flödestest.
I allmänhet väljs antikroppstestet som ett tilläggsverktyg för detektering av nukleinsyran för att förbättra detekteringsgraden för det nya koronaviruset under sjukdomskurserna. När antikroppstestet används tillsammans med ett nukleinsyratest kan det öka analysnoggrannheten för diagnosen covid19 genom att minska potentiella falskpositiva och falska negativa resultat. Den aktuella Operation Guide rekommenderar inte att du använder två typer av test separat som ett oberoende detekteringsformat men bör användas som ett kombinerat format. [2]
Figur 2:Rätt tolkning av nukleinsyra och antikroppstestresultat för detektion av ny koronavirusinfektion
Bild 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Novel Coronavirus IgM/IgG Antikropp Dual Rapid Test Kit (Strongstep®SARS-COV-2 IgM/IgG-antikropp snabb test, latex immunokromatografi)
Figur 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Strongstep®Novel Coronavirus (SARS-COV-2) multiplex PCR-kit i realtid (detektion för tre gener, fluorescerande sondmetod).
Notera:Detta mycket känsliga, färdiga PCR-kit finns i lyofiliserat format (frystorkningsprocess) för långvarig lagring. Satsen kan transporteras och förvaras vid rumstemperatur och är stabilt under ett år. Varje rör med premix innehåller alla reagens som behövs för PCR-amplifiering, inklusive omvänd-transkriptas, Taq-polymeras, primrar, sonder och DNTPS-substrat. Användare kan helt enkelt rekonstituera blandningen genom att tillsätta PCR-klass vatten tillsammans med mallen och sedan belastning på ett PCR -instrument för att köra förstärkningen.
Som svar på det nya Coronavirus-utbrottet har kalkning av bioprodukter Co. Ltd. arbetat snabbt för att utveckla två diagnostiska satser för att göra det möjligt för kliniska och folkhälsolaboratorier att snabbt diagnostisera covid-19-infektion. Dessa satser är mycket lämpliga för användning för storskalig screening i länder och regioner där det nya Coronavirus-utbrottet snabbt sprids och för att ge diagnos och bekräftelse för covid-19-infektion. Dessa satser är endast för användning under för-notifierat akutanvändningsautorisation (PEUA). Testning är begränsad till laboratorier som är certifierade enligt reglerna för de nationella eller lokala myndigheterna.
Antigendetekteringsmetod
1. Viral antigendetektering klassificeras i samma kategori av direkt detektion som nukleinsyradetektion. Dessa direkta detekteringsmetoder letar efter bevis på virala patogener i provet och kan användas för bekräftelsediagnos. Utvecklingen av antigendetekteringssatser kräver emellertid hög kvalitet på monoklonala antikroppar med stark affinitet och hög känslighet som kan känna igen och fånga patogena virus. Det tar vanligtvis mer än sex månader att välja och optimera en monoklonal antikropp som är lämplig för användning vid framställning av antigendetekteringssatsen.
2. För närvarande är reagensen för direkt upptäckt av det nya koronaviruset fortfarande under forskning och utvecklingsstadium. Därför har inget antigendetekteringssats har validerats kliniskt och kommersiellt. Även om det tidigare rapporterades att ett diagnostiskt företag i Shenzhen har utvecklat ett antigendetekteringssats och kliniskt testats i Spanien, kunde analysens tillförlitlighet och noggrannhet inte valideras på grund av närvaron av reagenskvalitetsproblem. Hittills har NMPA (före detta Kina FDA) inte godkänt något antigendetekteringssats för klinisk användning ännu. Sammanfattningsvis har en mängd detekteringsmetoder utvecklats. Varje metod har sina fördelar och begränsningar. Resultaten från olika metoder kan användas för verifiering och komplement.
3. Att producera ett testkit av kvalitet covid-19 beror starkt på optimering under forskning och utveckling. Liming Bio-Product Co., Ltd. Testsatser krävs för att uppfylla stränga tillverknings- och kvalitetskontrollstandarder för att säkerställa att de ger de högsta nivåerna av prestanda och konsistens. Forskarna vid Liming Bio-Product Co., Ltd. har över tjugo års erfarenhet av att utforma, testa och optimera in vitro-diagnostiska satser för att säkerställa den högsta prestandanivån i analytisk kvantifiering.
Under den covid-19-pandemin mötte den kinesiska regeringen en ökning av den enorma efterfrågan på epidemiska förebyggande material i de internationella hotspots. Den 5 april, på presskonferensen för statsrådets gemensamma förebyggande och kontrollmekanism "som stärker kvalitetshanteringen av medicinska material och reglerar marknadens ordning", Jiang Fan, en första nivå inspektör för utrikeshandelsavdelningen i ministeriet av handeln, sade, "Därefter kommer vi att fokusera våra ansträngningar på två aspekter, först, för att påskynda stödet från fler medicinska förnödenheter som det internationella samfundet behövde, och också för att förbättra kvalitetskontroll, reglering och hantering av produkterna. Vi kommer att ge Kinas bidrag till att gemensamt svara på den globala epidemin och bygga ett samhälle med en delad framtid för mänskligheten.
Bild 5:Limning av bioprodukter Co.
Hederscertifikat
Houshenshan
Bild 6. Likande bioprodukter Co., Ltd. stödde Wuhan Vulcan (Houshenshan) bergssjukhus för att slåss mot den covid-19-epidemin och tilldelades hederscertifikatet för Wuhan Red Cross. Wuhan Vulcan Mountain Hospital är det mest berömda sjukhuset i Kina som specialiserat sig på behandling av allvarliga Covid - 19 patienter.
När det nya Coronavirus-utbrottet fortsätter sprids runt om i världen, stiger Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. upp för att stödja och hjälpa samhällen över hela världen med vår innovativa teknik för att bekämpa detta enastående globala hot. Snabb testning av covid-19-infektion är en kritisk del av att hantera detta hot. Vi fortsätter att bidra på ett betydande sätt genom att tillhandahålla diagnostiska plattformar av hög kvalitet i händerna på Frontline Healthcare-arbetare så att människor kan få de kritiska testresultaten de behöver. Limning av Bio-Products Co., Ltd.s ansträngningar i kampen mot Covid-19-pandemin ska bidra med vår teknik, erfarenheter och expertis till internationella samhällen för byggandet av ett globalt öde.
Long Press ~ skanna och följ oss
E-post: sales@limingbio.com
Webbplats: https://limingbio.com
Inläggstid: maj-01-2020
